山西省儿童医院(山西省妇幼保...科普号

我们中心胚胎移植术后，常规会在移植第10天或者12天检测血B-HCG。然后会再次查隔日的血B-HCG值，看看血值的翻倍情况，预测胚胎发育的顺利与否。在移植第28天，来医院做B超，查看怀孕是单胎？双胎？三胎？宫内宫外妊娠？性子比较急的人，会在移植第7-8天就测尿B-HCG，阳性后非常高兴，可是在第10天来医院复查血B-HCG，医生告诉说没怀孕。为什么？这就是药物绒促性素的作用。所以建议移植第10天或者12天检测血B-HCG，减少没必要的情绪波动。临床还有少数人，移植第10天或者12天检测血B-HCG，医生告诉没有 怀孕，可是回家停药后，月经不来，或者仅仅阴道少量出血。来医院发现怀孕了。这部分病人，往往宫外孕可能性要大。值得我们医生和病人提高警惕。

如果病人自己怀孕，因为输卵管的原因，老是宫外孕。2-3次宫外孕后，是谁都会害怕。我们做试管婴儿，就是避开了输卵管，宫外孕的几率比自己怀孕，会很低。但是也不能百分百避免的。所以我们临床会有好多的方法来，预防试管婴儿的宫外孕。比如：如果输卵管积水，建议结扎输卵管，因为积水的不规则流动，会把胚胎冲刷到子宫腔外，引起宫外孕。另外老是宫外孕病人，我们会建议病人移植第5天或者第6天的囊胚，从而更好地降低宫外孕发生率。

移植胚胎前，我们老听医生说，憋点尿，有利于移植。等移植时，又听见医生说，憋多了，尿一半去吧。病人就蒙了，尿一半时尿多少？首先移植前，甜饮料都会让憋尿更快点。但是必须注意：不是尿憋的越多越好。尿太多，病人高度紧张，B超探头按压，就会使病人腹肌不由自主，更加用力，如果加上子宫后位。移植难度加大，不利于移植。所以移植时最佳的憋尿是不感觉尿急，不感觉憋不住为适宜。如果移植时，自己感觉已经憋不住尿了，或者移植完憋不了10分钟，那就先去排出部分尿液，方法是：开始排尿时，数数10下，就终止排尿。

胚胎移植后，胚胎是被放在子宫内膜里面的，具体能不能扎到内膜里面，存活下来，形成一个孕囊，是要看胚胎和内膜之间的反应。所以不管是躺着还是站着，或者活动，都不会影响胚胎和内膜的反应。胚胎是在百万倍的高倍镜下才能看见的“东西”。内膜这片土地上，胚胎这个小小小小的种子，是不会从阴道掉出来的。所有对于患者来讲，移植后三天，适当好好休息，调整心情就好了。之后可以正常上班、生活的。一直卧床休息，不能提高妊娠率，往往活动减少，容易引起便秘。

我们中心在取卵后，都会发给患者一个纸条，上面清清楚楚写着各种注意事项。取卵后在医生给患者这个纸条时，一定注意医生这个时候的话，任何一个字都不能拉掉，对患者绝对有利。任何嘱咐都是为了患者的术后尽快恢复。那么如果取卵数在20个以下，并且医生没有作任何特殊交代，那么大家可以不用特殊护理。只要不剧烈活动就可以了。也不用听别人说不敢吃这，不敢吃那，连水都不敢喝，如果真这样，损伤的是患者自己的身体。如果身体恢复不好，即使移植，成功率也不高啊。鸡汤、鱼汤、蛋白粉、脉动都随便喝。其他饮食也都可以。如果取卵数超过20个，那么注意了，医生会交代很多话，这些话那个纸条上面也有。所以自己回家也要好好看。可以少喝水，多吃肉类食物、喝纯牛奶、鱼汤（要熬成白白的汤最好）等高蛋白的饮食。保证每天都有一定的尿量。必要是医生会给予药物治疗的。也就是说取卵数大于20个，所有交代的吃喝和药物都是为了保证一定的尿量。少活动，拒绝剧烈活动是怕卵巢扭转等急腹症。脉动饮料一般是让冻胚周期移植的患者喝的，目的让患者在移植前憋点尿，因为脉动里面有糖类物，产尿较快。所以才让喝的。取卵数大于20的患者不建议大量喝，喝大量的鸡汤、鱼汤、蛋白粉就好了。本文系陈艳花医生授权好大夫在线（www.haodf.com）发布，未经授权请勿转载。

知道了试管婴儿的流程，做到心里有数就不会对未知的事情，感到无措了。需要咱们患者配合的就是体检，打针，取卵，移植。最核心的胚胎培养交给咱们实验室的专家。其中可能最“取卵”让人觉得“痛苦”了，因为要进手术室，那个消毒的，敞亮的，门关的紧紧的手术室，让人感到害怕。取卵目前，好多生殖中心都采取静脉麻醉来辅助。减轻患者的疼痛，更重要的是减轻患者的焦虑。当然，在没有静脉麻醉的以前，患者取卵的疼痛都是在可接受范围的。

移植后，许多患者习惯于选择卧床休息，减低日常活动，常在移植后卧床休息3-5天，更甚者移植回家后静卧2周！ 本能认为胚胎移植后静卧休息，避免过早的起床活动可阻止胚胎排出体外，有利于胚胎着床。 但事实是否如此呢？！ 胚胎移植后卧床休息时间长短并不影响妊娠率 子宫解剖位置解释移植后卧床休息的不合理性 试管婴儿发展早期，建议胚胎移植术后卧床休息。推荐卧床休息的理由是认为减少日常活动及仰卧的体位会降低胚胎由于重力的原因排出体外的风险。1988年，有学者提出移植后卧床休息在解剖学上没有理论依据。他们认为在膀胱未充盈的情况下，与仰卧位相比较，前屈的子宫在人体直立位置时几乎是处于水平位的，胚胎并不会因为重力的原因排出体外。 因此，他们鼓励在移植术后起床和正常活动，且研究结果显示，妊娠率甚至有所提高！但此后陆续的研究报道发现直立或仰卧位两种体位的妊娠率并无差别。 卧床休息不同时间对妊娠率的影响 立即走动与10-30分钟的比较：在我中心行胚胎移植术后，身体若无不适可累积离开生殖中心，不需要卧床休息10-15分钟。我中心的建议是得到文献研究结果支持的！2013年的一项研究结果显示了卧床休息10-15分钟者的胚胎种植率、活产率并不优于未卧床组。其他研究也显示了与未卧床相比较，卧床休息30分钟仍没有提高妊娠率。有人可能就会提出疑问，是不是卧床休息的时间不足够呢？ 立即走动与1小时的比较：2005年一项临床研究评估胚胎移植术后延长卧床休息时间是否对妊娠率有积极的影响。研究中部分患者移植后卧床休息一个小时，而部分患者移植后即正常行走离开生殖中心。结果显示未卧床组的妊娠率稍高于卧床休息组，但这种升高是没有达到统计学差异的，也就是没有临床意义。这结果充分说明了胚胎移植术后过分关注卧床休息，其实是不必要的。 1小时与24小时的比较：试管婴儿发展早期，曾建议患者卧床休息24小时，当然，当时此建议并未得到研究结果的支持。随着试管婴儿的快速发展，较多研究探讨移植术后卧床休息，甚至限制日常活动的必要性。早在1993年的一项研究结果显示，移植术后卧床休息24小时（这个时间够久了啦），然而与卧床休息1小时患者相比，妊娠率及流产率并未有显著改善！ 移植后卧床休息有没有必要？！ 告诉您，没有必要！ 而且长时间的卧床休息还会起反作用的效果哦！ 胚胎移植后长时间卧床休息的弊处 心理负担的增加不利于胚胎着床 试管婴儿治疗前的心理状态对治疗结局会产生一定的影响，心理支持对提高试管婴儿成功率有一定的辅助作用。研究报道，移植后长时间卧床休息会限制日常的活动，影响工作及加重心理负担，导致患者紧张不安，影响妊娠结局。不孕患者求医多年，心理压力及经济负担重，长时间处于应激状态下会导致患者焦虑、紧张，神经内分泌调节失常，最终也会影响妊娠结局。移植后有限的日常生活可减轻心理压力，分散患者的注意力，改善全身血液循环，改善内分泌环境和免疫功能。 长时间卧床影响血液循环及增加尿路感染、便秘发生率 研究指出卧床休息时间过长不利于子宫的血液循环，影响宫腔血液灌注，进而可能影响胚胎的植入。移植后长时间卧床及强迫性仰卧体位，造成患者背部肌肉疲劳过度，腰背部软组织和肌肉紧张，患者不舒适感明显，如腰酸、头晕等。因卧床休息，膀胱充盈也不愿意起床，致使膀胱收缩无力，造成尿储留，同时也会导致肠蠕动减慢，因此，长时间卧床泌尿系感染及便秘的发生率增加且有可能引发下肢静脉栓塞。 临床医生常说，胚胎与子宫内膜类似于种子与土壤的关系。好的土壤，种子才可以开花结果，同样的道理，胚胎的成功着床需要的是优良的胚胎及准备充分的子宫内膜等。试管婴儿的成功与否不会因为各位胚胎移植后是否卧床休息而受到影响。

我的名字叫做卵巢，我和双胞胎妹妹生活在女性的盆腔内。自青春期开始，我们每个月经周期轮流为主人提供一颗优质的卵子公主，然后期盼着卵子公主和精子骑士相爱结合。一天，主人病了，医生说要借助“试管婴儿”才能有小宝宝，于是我们的生活开始发生了改变…… 所谓卵巢早衰（prematureovarian insufficiency，POI）是指40岁之前丧失卵巢活性，表现为月经紊乱（闭经或月经稀发）伴有促性腺素升高和雌激素降低。发病率约为1%。该指南制定小组（GDG）指出定义为：（i）月经稀发或闭经至少4个月，（ii）两次随机（间隔>4周）FSH > 25 IU/L。 相信所有女性都是惧怕卵巢早衰的，那意味着更年期。所以往往有这样的顾虑：促排卵会引起卵巢早衰吗? 我想这样的担心是来源于以前的生物知识，女性的卵泡数是出生时就固定的，出生后不再新生卵泡，一生约排400-500个卵泡，故担心原本每月只排一个卵泡，进入促排卵后是不是把以后的卵泡都提前排了，会不会因此卵巢早衰呢？其实不是的，所以今天我们就来讨论这个问题。 卵巢内卵泡的发育 首先卵泡发育的过程是静止卵泡，早期生长卵泡（次级卵泡----窦前卵泡---早期窦卵泡----选择卵泡），窦卵泡生长期，成熟卵泡。静止期卵泡是非促性腺激素依赖的，受遗传因素和局部的调控因子影响。只有到了次级卵泡阶段，才开始对促性腺激素低敏感，并逐渐发育至窦卵泡，这个过程需要60天，开始成为促性腺激素依赖期。当窦卵泡形成直径到达2mm后，这也是通过B超我们所能看到的小卵泡。之后，颗粒细胞明显增加，对FSH敏感性进一步增加，依赖FSH 继续发育，直径从2mm生长到18mm，约需25天，后15天相当于月经周期的卵泡期。 在卵泡成熟的过程中有一个很重要的阶段就是募集过程，就像众所周知的精子数量的庞大，最后受精的却只能是千百万中的一个。窦卵泡的募集发生在月经的第1-4天。对于正常年轻女性来讲，进入募集阶段的卵泡均有20-30个左右，称为卵泡簇。卵泡的发育都需要符合一定的水平，有些卵泡对低FSH敏感，而有些不敏感，故敏感的卵泡进入了生长的下一阶段。促排卵则是通过增加FSH的剂量使部分不敏感的卵泡则进入了敏感行列，进一步生长，达到成熟卵泡的标准，故通常情况下促排卵可以获得比自然周期更多的卵泡。当然在促排卵过程中也是一个进一步募集的过程，如发育中的卵泡不能紧跟优势卵泡的发育，那么它仍不能最终成为成熟卵泡。 卵巢早衰的主要原因 卵巢早衰，发生几率1-2%，目前主要原因如下，染色体方面的异常，特别是X染色体的异常，如Turner综合症（X染色体缺失），脆性X综合症，其次对卵巢毒性的药物如化疗、盆腔放疗、卵巢相关手术治疗、自身免疫疾病等。 尽管如此，仍有相当部分的卵巢早衰是原因不明的，因为人是一个整体。心理因素也会影响卵巢功能，如高强度的工作负荷，焦虑抑郁等紧张心理，过度熬夜都可影响卵巢功能，目前因为社会节奏的改变，这方面原因的卵巢早衰在增加。所以希望大家调整好心态，合理安排生活与工作，拥有一个积极健康的方式提高生活质量。 卵巢早衰的检查 1、建议POI妇女戒烟、定期体育锻炼、维持健康体重以减少心血管风险。 2、妊娠：POI妇女自然怀孕的几率很低，但如果无妊娠意愿应避孕。应告知POI妇女无提高卵巢活性和自然受孕的可靠手段，赠卵是POI女性获得妊娠的主要方法。POI偶发排卵而获得的自然妊娠和多数化疗药物并不增加其产科和新生儿风险。赠卵具有较高风险，应在合适的产科机构操作。患者及其配偶应跟产科团队告知其妊娠来源。应根据所述卵母细胞捐赠者的年龄决定产前非整倍体的筛选。 3、妊娠前及妊娠期评估：拟接受赠卵的应于孕前全面检查包括甲状腺、肾上腺功能以及核型。以前暴露于蒽环类、高剂量环磷酰胺或纵隔照射的孕妇孕前应该查超声心动图，如有必要应转诊至心血管科。Turner综合征女性应该由具有成人先天性心脏疾病专科知识的心脏病专家评估，并进行一般医学检查（包括血压、肾功、甲状腺功能）及内分泌检查。有些患者可能因具有致命性危险而不适于妊娠。放疗后子宫妊娠产科合并症多，应在适当的产科机构产检。Turner综合征产科及非产科并发症均较高，应在具有心血管科室的产科机构产检。心脏病专家应参与照顾那些接受蒽环类药物化疗和/或心脏照射孕妇。 4、骨质保护：POI与骨密度（BMD）减少有关，继而可能引起骨折。保持健康的生活方式包括负重锻炼，避免吸烟和维持正常体重；推荐富含钙和维生素D的均衡饮食；替代性应用雌激素；口服避孕药对骨质效果欠佳；其他药物治疗，包括双膦酸盐，应根据骨质疏松专家的意见予以应用。患者有妊娠意愿时尤其要慎重。所有POI妇女确诊时均应监测BMD，如果骨密度正常且已经开始足量系统的雌激素替代治疗，重复DEXA扫描是没有意义的。如果已诊断骨质疏松症并开始雌激素替代或其他疗法，骨密度测量5年之内应重复。如果BMD下降应及时审查雌激素替代治疗或其他潜在因素。 5、心血管系统危害：POI妇女心血管疾病的风险增加，可通过良好的生活行为习惯降低其风险。所有诊断出患有特纳综合征所有妇女均应由具备先天性心脏疾病的专业知识的心脏病专家评估。尽管缺乏纵向的结果数据，强烈建议早期开始激素替代治疗（HRT）预防心血管疾病。如果有危险因素至少每年需对血压，体重和吸烟状况进行监测。Turner综合征，在诊断时应评估心血管健康因素，并每年监测（至少包括血压，吸烟状态，体重，血脂，空腹血糖，糖化血红蛋白）。 6、生活质量：POI对患者心理健康及生活质量产生明显的负面影响。应予以心理方面及生活习惯的干预，并对性生活及性功能定期评估和咨询。适量的雌激素替代被认为是性功能正常化的起点。性交困难者可局部应用雌激素。长期应用睾酮的影响尚不明确，患POI的女性宜接受药物使用性的合理意见及建议，以便其在充分知情的情况下做出更为合理的选择。局部应用雌激素对生殖泌尿神经系统症状有效。润滑剂用于治疗未使用HRT女性的阴道不适，性交痛有用效。 7、神经功能：对于年龄小于50岁行子宫切除或卵巢切除时应与患者讨论对认知可能的影响，尤其是预防性切除时。可以考虑雌激素替代来降低POI妇女认知损伤可能的风险直到平均自然绝经年龄。妇女POI应建议改善生活方式（如锻炼，戒烟，保持健康的体重），以减少认知功能障碍可能出现的风险。 卵巢早衰的治疗 1、HRT的指征：用于治疗低雌激素症状，可以预防心血管疾病和骨质流失。 2、HRT的风险：在自然绝经前应用HRT未发现有增加乳腺癌风险。应雌孕激素联合以保护内膜。 3、HRT监测：一旦开始治疗需每年复查。 4、POI患者合并其他疾病应用HRT：Turner综合征者应在整个生育年龄应用HRT；乳腺癌为HRT相对禁忌，对于BRCA1/2突变携带者，无乳腺癌病史且已行预防性双附件切除者可选择HRT；因内异症切除卵巢者建议联合雌孕激素用药；偏头痛非HRT禁忌，如使用期间症状加重应考虑调整剂量和途径，经皮给药副作用小；高血压并非HRT禁忌，优选经皮给药；VTE患者应首先咨询血液科医生，如可HRT优选经皮给药；肥胖者优选经皮给药；子宫肌瘤并非HRT禁忌。 5、在应用HRT时应建议患者生活行为改变也可以降低风险，此外安全数据仍然有限。

最近有患者经常向我咨询，为什么做唐氏筛查，需要告知检验科医师准确的孕周时间，这个有必要吗？针对这类型的问题生殖小青年，就对患者朋友进行一个简单普及！其实我们通常所说的唐氏筛查往往指的是唐氏血清学筛，而除了唐氏血清复查以外我们还有很多筛查遗传病的方法，目前较为普及的便是通过二代测序进行的无创产前筛查（NIPT）和超声筛查等。还有像我们所说的有创性产前诊断，它主要通过取胎儿细胞，进行细胞培养，进而染色体核型分析，是目前诊断的金标准。包括早孕基（9-12周）绒毛穿刺、中孕期（16-22周）的羊膜腔穿刺及中晚期（21-39周）的脐血穿刺。但是这些方法呢，技术及设备条件要求要要、周期长、标本采集为侵入性操作，费用昂贵，同时像穿刺诊断还有流产的风险。所以很多普通患者还是更倾向于相对便宜、无创的唐氏血清学筛查，所以今天生殖小青年还是为大家介绍最为传统的无创血清学筛查。首先我们来介绍一下什么是唐氏综合征？唐氏综合征（Down Syndrome，DS）又称 21-三体综合征、先天愚型，是一种最常见的染色体病。我国唐氏儿发生率 1/600～1/800，但 2/3 的唐氏儿在妊娠早、中期自发流产或死胎，其实际发生率更高。唐氏儿存在严重智力障碍、体格发育障碍，50%伴有各种先天畸形，生活不能自理，至今尚无有效治疗方法。不但给患儿造成终身痛苦，也给家庭和社会带来沉重的负担。因此对胎儿进行血清学或遗传学筛查、超声检查，必要时行介入性产前诊断，防止唐氏儿出生，对提高人口素质具有重要意义。简单介绍唐氏血清学筛查的历史进程血清学筛查是指通过经济、简便、无创的检测方法，从普通人群中发现怀有唐氏综合征胎儿的高风险孕妇，以便对其进行进一步产前诊断，最大限度地减少唐氏综合症患儿出生。1984 年英国 Merkatz 等最先发现怀有 DS 胎儿的孕妇，血清 AFP 水平为正常孕妇的 70%。1987年 Bogart 等发现怀有 DS 胎儿的孕妇，血清中的β-hCG 的水平是正常孕妇的 2 倍。1988 年 Canick 等发现怀有 DS 胎儿的孕妇，血清中的uE3 的水平比正常孕妇低 25%。1993 年 Brambati 等发现怀有 DS 胎儿的孕妇，血清中妊娠相关血浆蛋白-A（PAPP-A）含量显著低于正常孕妇。单个血清学指标筛查 DS，检出率低且假阳性率高，逐渐被多指标联合筛查取代。孕中期 AFP、β-hCG 二联筛查，在 5％假阳性率情况下，DS 检出率为 60%～65%；加上 uE3，DS 检出率为 65%～77%。孕早期PAPP-A、β-hCG 二联筛查，DS 检出率率为 65%。目前，血清学筛查的主要模式为孕早期 PAPP-A、β-hCG 二联筛查，孕中期 AFP、β-hCG、uE3三联筛查。唐氏血清学筛查的具体操作流程1. 检测前抽取静脉血：抽孕妇肘前静脉血2～3mL，离心后取上清液保存于4℃低温冰箱，一周内完成检测。2. 实验室检测：采用相关仪器（不同实验室采用遗传不同）测定血清标志物：妊娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A)、游离绒毛膜促性腺激素(Free β-hCG)、甲胎蛋白(AFP)、游离雌三醇(uE3)。孕早期测定PAPP-A、β-hCG，孕中期测定AFP、β-hCG、uE3。3. 风险计算：运用lifecycle筛查软件，输入孕妇血清标志物值、出生时间、体重、抽血日期、末次月经、孕周（月经不调者B超确定孕周）、胎数、是否有不良孕产史（包括自然流产、习惯性流产、死胎、死产、生育畸形儿情况）、有无胰岛素依赖性糖尿病史及吸烟史等信息，进行风险评估。4. 风险评估：21-三体风险值≥1/270为唐氏综合征高风险。如果评估为高风险的患者我们该怎么办？血清学筛查高风险孕妇常规建议进行介入性产前诊断，即通过绒毛活检术、羊膜腔穿刺术、脐带穿刺术等方法获取细胞，进行体外培养后，分析胎儿染色体核型。由于介入性产前诊断具有胎儿丢失、宫内感染、出血等风险，患者及其家属存在侥幸心理等原因，部分高风险孕妇拒绝进行产前诊断。目前国内很多机构也开展了无创性产前诊断，即通过检测母血中胎儿有核红细胞、游离DNA、游离RNA进行诊断。虽然取得了一定进步，但是由于母血中胎儿的遗传物质较少，其分离、富集方法繁琐复杂，且仅检测21-三体、18-三体、13-三体，价格昂贵（是唐氏血清学检查的4-6倍）。目前该技术在产前诊断中总体上仍处于市场推广阶段，不过年底个别省份有可能降到1000元以内。本文系崔向荣医生授权好大夫在线（www.haodf.com）发布，未经授权请勿转载。

近日常有患者于网上咨询，当出现反复移植失败时为什么要进行封闭抗体检查，主动免疫治疗对移植失败及复发性流产到底有什么作用，以及很多患者反映看不懂封闭抗体报告单，那今天生殖小青年，就对很多患者提出的问题进行一一解答！简介解释一下复发性流产和反复种植失败在临床上的界定复发性自然流产（RSA）是指临床上连续2次或2次以上的自然流产（包括：多次生化妊娠、空孕囊、无胎心、胎心消失等），是一种常见的妊娠并发症，发生率占妊娠总数的0.4%～0.8%。RSA 中约有40%～80%临床上找不到明确病因，称为不明原因反复自然流产。反复种植失败的定义并没有统一的标准，大家比较认同的定义为：重复IVF治疗超过 3个移植周期；或者累计移植≥10个高评分胚胎未能怀孕者；或者各中心自定义移植胚胎数目。由于近年来单胚胎移植和囊胚培养技术普及，过去的标准显然不适用了，因此有人提出以胚胎计算的标准，如累计移植4枚高评分胚胎，或2枚囊胚仍然不能怀孕者。什么叫主动免疫缺陷，它和复性流产有什么关系？主动免疫缺陷：这类患者的体内不能产生保护胚胎的主动免疫抗体，对胚胎产生了免疫攻击，就是我们常说的“封闭抗体”缺乏，可以通过丈夫淋巴细胞的注射，诱导自身的主动免疫功能。但是目前我们采用的流式细胞仪的检测方法，并不能真正反映自体的主动免疫状态，因此治疗存在一定的盲目性。1981年，来自英国的Taylor和 美国的Beer 等创立了反复流产的主动免疫疗法，首次采用淋巴细胞人为的强化妊娠的免疫学维持机制，成功治愈原因不明性习惯性流产患者，开辟了反复流产治疗的新途径。此后，国内专家林其德等（1996 年）也将主动免疫疗法成功的应用于反复流产患者的治疗。如何解读封闭抗体报告单封闭抗体是妊娠时母体的一种胚胎保护性抗体，可以防止胚胎滋养层的父系抗体被母体免疫系统识别和攻击，使胚胎得到保护并生长发育。母体缺乏封闭抗体可能对胚胎儿产生排斥反应，孕早期出现流产，孕晚期出现妊娠高血压综合征、胎儿宫内生长迟缓、甚至胎死宫内。按理论来说，正常妊娠的女性体内应该可以检测出“封闭抗体”，在同种免疫型复发性自然流产女性中，通常缺乏此种抗体。“封闭抗体”缺乏而导致的一系列反应是免疫系统淋巴细胞比例和功能的改变，如：具有细胞毒性的T细胞增多、具有免疫抑制功能的T细胞减少、自然杀伤细胞数量和毒性的增加等，胚胎和胎盘等成为免疫细胞攻击的靶点，胎盘血管生成出现障碍。由于“封闭抗体”有很多种，至少包括：抗HLA-D/DR抗体、抗丈夫淋巴细胞毒抗体(APCA)、抗TLX抗体(滋养层及淋巴细胞交叉反应抗体，Ab1)、抗独特型抗体（Ab2）、混合淋巴细胞反应封闭抗体(MLR-Bf)、抗Fc受体抗体等等，一般通过细胞毒性试验或夫妇间的淋巴细胞混合培养反应来检测，目前很多实验室只测其中某一个指标来下诊断结论,往往不是很全面，所以很多人查不出“封闭抗体”是阳性。由于目前多采用流式细胞术对T淋巴细胞及其亚群检测来间接分析封闭抗体，所以我在这里主要对T淋巴细胞检测进行详细解说。在正常妊娠早期，CD8+细胞数量增多，CD4+/CD8+比值的降低，有利于胚胎免遭母体免疫系统的排斥，因为CD8+细胞在机体的免疫反应中发挥负调节作用，即可抑制B细胞介导的体液免疫，又可抑制CD4+细胞介导的迟发型超敏反应和增殖反应，还可对自然杀伤细胞及巨噬细胞的杀伤功能产生调控作用。在研究报导，RSA患者外周血中CD8+细胞百分率显著下降，CD4+/CD8+比值明显升高，有效治疗后可逆转。因此动态了解T淋巴细胞及亚九群的变化，对疾病的判断具有重要意义。分类细胞表型项目名称参考值不值实验室有不同参考值对照值直接检测男性全血T亚群CD3+T60-80%CD3+ CD4+Th30.09-40.4%CD3+ CD8+Ts20.74-29.4%测定值男性全血添加女性血清后检测T亚群CD3+T-260-80%CD3+ CD4+Th-230.09-40.4%CD3+ CD8+Ts-220.74-40.4%封闭效率对照值—测定值CD3-BET细胞封闭效率>0CD4-BETh细胞封闭效率>0CD8-BETs细胞封闭效率>0封闭抗体结果分析对照组：直接检测男性全血T亚群；测定组：向男性全血加女性血清后再检测T亚群；封闭效率：即直接检测男性全血的结果减去对应加了女性血清的结果所得的差值，其正常值>0。主动免疫治疗流程主动免疫的整个流程并不复杂，对于实验操作人员来讲，就是离心离心再离心，事个过程就是离心等时间的过程，所以敬请各位患者朋友在实验室外等候时不要焦虑，从整个流程下来来看，每个患者一般从采完血到注射完大约需要1.5个小时，请大家一定要进行耐心等待。（1）免疫原可为丈夫或第三方的淋巴细胞，皮内注射。供受者双方无血缘关系。供受者双方均需筛查输血前全套，肝炎系列、HIV、梅毒等均无异常方可进行此项治疗，孕前开始治疗；（2）采集供血者静脉血肝素搞凝静脉血25ml，去掉注射针头，缓慢加入事先准备好的加有10ml生理盐水的无菌培养瓶内，轻轻混匀，将培养瓶放入超净工作台内，室温静置15min；（3）用巴斯德管将生理盐水稀释后的35ml肝素化血液分别加入事先准备好的3支各加有4ml淋巴细胞分离液的无菌离心管中，操作时注意将血液沿管壁慢慢加入，使分离液与血液形成整齐的液面；（4）将离心管放入自动平衡离心机内，以2500rpm室温离心20min，小心取出离心管，在超净工作台内，将上层血浆吸出，弃掉；（5）小心吸取中间液面上白色雾状的单核细胞，转入2支新的离心管，加入生理盐水，轻轻吹打混匀，以2300rpm室温离心10min，弃上清，加入适量生理盐水，轻轻吹打混匀，将2支离心管内的细胞并入1支离心管内，以2000rpm室温离心8min，弃上清，加入1.2ml生理盐水，混匀，细胞浓度约为（20-40）×106/ml；（6）将所得的淋巴细胞悬液，于患者前臂分6处作皮内注射，每处200微升（注：由于1ml皮试注射器推注时压力较大，须用手将注射针脱开，造成淋巴细胞液喷出浪费）。