中山市博爱医院肿瘤科科普号

引用消化系统肿瘤转移相关蛋白质组学的研究进展

第２８卷第５期２００８年１０月国际病理科学与临床杂志ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅＶｏｌ．２８Ｎｏ．５Ｏｃｔ．２００８收稿日期：２００８０５１２修回日期：２００８０７２８作者简介：徐佳鸣（１９８５），男，浙江湖州人，临床八年制２００４级学生，主要从事肿瘤蛋白质组学的研究。通讯作者：李学农，Ｅｍａｉｌ：ｌｅｅｘｕｅ０＠１２６．ｃｏｍ基金项目：国家自然科学基金（３０７７０９７５）ＴｈｉｓｗｏｒｋｗａｓｓｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（３０７７０９７５）·综述·消化系统肿瘤转移相关蛋白质组学的研究进展徐佳鸣综述李学农审校（南方医科大学第一临床医学院，南方医科大学基础医学院病理学教研室，广东省分子肿瘤病理学重点实验室，广州５１０５１５）［摘要］蛋白质组学已经成为当今研究肿瘤转移领域的核心技术之一，在筛选肿瘤转移相关蛋白方面中取得了许多进展。通过蛋白组学技术可以找到肿瘤转移相关蛋白，不仅有助于揭示肿瘤发生、发展的分子机制，为肿瘤转移诊断和预后预测提供生物学标志物，还可以为肿瘤治疗提供靶点。［关键词］蛋白质组学；肿瘤；转移；生物学标志［中图分类号］Ｒ７３５［文献标识码］Ａ［文章编号］１６７３２５８８（２００８）０５０３８１０５ＡｄｖａｎｃｅｓｉｎｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｕｍｏｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｄｉｇｅｓｔｉｖｅｓｙｓｔｅｍＸＵＪｉａｍｉｎｇ，ＬＩＸｕｅｎｏｎｇ（ＦｉｒｓｔＣｌｉｎｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙ，ＳｏｕｔｈｅｒｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＫｅｙＬａｂｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＣａｎｃｅｒＰａｔｈｏｌｏｇｙｉｎＧｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０５１５，Ｃｈｉｎａ）［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓｈａｓａｌｒｅａｄｙｂｅｃｏｍｅｏｎｅｏｆｔｈｅｋｅｙｍｅｔｈｏｄｓａｎｄｍａｄｅｇｒｅａｔｐｒｏｇｒｅｓｓｉｎｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｔｕｍｏｕｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．Ｂｙｍｅａｎｓｏｆｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，ｍｅｔａｓｔａｓｉｓｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓｃａｎｂｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｔｏｉｌｌｕｓｔｒａｔｅｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓｐｒｏｖｉｄｅｎｏｔｏｎｌｙｒｅｌｉａｂｌｅｅｖｉｄｅｎｃｅｆｏｒａｎｅａｒｌｙｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｉｓ，ｂｕｔａｌｓｏｎｏｖｅｌｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｔａｒｇｅｔｓｆｏｒｔｕｍｏｒｓ．Ｉｎｔｈｉｓｒｅｖｉｅｗ，ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｉｎｔｕｍｏｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｄｉｇｅｓｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｉｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓｗｅｒｅｅｘｐｏｕｎｄｅｄ．［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ；ｔｕｍｏｒ；ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ；ｂｉｏｍａｒｋｅｒ［ＩｎｔＪＰａｔｈｏｌＣｌｉｎＭｅｄ，２００８，２８（５）：０３８１０５］肿瘤蛋白质组学（ｏｎｃｏｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ）是蛋白质组学应用于肿瘤学领域而产生的新兴学科，围绕着肿瘤的分子机制、诊断和治疗等方面开展研究，寻找其生物学标志物以及治疗靶点。肿瘤发生是多基因参与的复杂过程，包括肿瘤细胞的黏附、迁移、增殖等。但从基因的表达产物来看，肿瘤是一种蛋白质组疾病，它的发生发展与一些特定的蛋白质的变化而导致细胞信号通路的改变有关。因此利用蛋白质组学技术筛选肿瘤相关的特征蛋白已经成为当今的一个主攻方向。转移是恶性肿瘤致死的主要原因。若找到与肿瘤转移有关的蛋白质，就可以早期发现肿瘤转移，同时针对其设计抗体、化疗药物等来阻止肿瘤转移，这将极大丰富临床治疗肿瘤的手段，提高肿瘤患者的生存率。目前，科学家们在寻找肿瘤转移相关蛋白方面建树颇多，发现了许多与肿瘤转移密切相关的蛋白。消化道肿瘤蛋白质组学研究极大的丰富了人们对其的认识和了解，目前发现并且在未来有望成为新的肿瘤转移标志物见表１。３８１第５期国际病理科学与临床杂志第２８卷表１蛋白质组学技术筛选的消化系统肿瘤转移相关蛋白Ｔａｂ．１Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓｏｆｄｉｇｅｓｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓｔｅｃｈｎｉｑｕｅ肿瘤类型肿瘤转移相关蛋白胃癌ｒａｎｓｆｅｒＲＮＡｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ，ｆｌａｖｏｐｒｏｔｅｉｎ，ｐｙｒｕｖａｔｅｋｉｎａｓｅ，ａｄｅｎｙｌａｔｅｋｉｎａｓｅ，ａｎｎｅｘｉｎｓ，ｋｅｒａｔｉｎ，ｐｆｅｔｉｎ，ＧＳＴ－ｐｉ，ｃｏｆｉｌｉｎ，ＨＳＰ２７，ｖｉｍｅｎｔｉｎ，ｇａｌｅｃｔｉｎ１大肠癌Ｔｒｉｏｓｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｉｓｏｍｅｒａｓｅ，ａｌｐｈａ－ｅｎｏｌａｓｅ，ａｎｎｅｘｉｎ，ｃｈａｐｅｒｏｎｉｎ，ＮＭＰｓ，ＧｎＴ－Ｖ，ＴＩＭＰ－１，ＡＴＰｓｙｎｔｈａｓｅ，ｓｙｎｏｖｉａｌｓａｒｃｏｍａＸ５ｐｒｏｔｅｉｎ，ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎｓ，ｖｉｍｅｎｔｉｎ，ｂｅｔａ－ａｃｔｉｎ，ｒｅｌａｘｉｎ，ＡＰＣ，ＨＳＰ６０，ｃａｌｒｅｔｉｃｕｌｉｎ，ｃａｔｈｅｐｓｉｎＤ，ＲＳＰ４肝癌ＦＬＳ，ＡＫ３，ｂｉｌｉｖｅｒｄｉｎｒｅｄｕｃｔａｓｅＢ，ａｎｎｅｘｉｎ１，Ｓ１００Ａ４，ｍｉｔｏｆｉｌｉｎ，ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃｒｅｔｉｃｕｌｕｍｐｒｏｔｅｉｎ２９，ｕｂｉｑｕｉｎｏｌ－ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅＣｒｅｄｕｃｔａｓｅｃｏｍｐｌｅｘｃｏｒｅｐｒｏｔｅｉｎＩ，ｐｅｒｏｘｉｓｏｍａｌｅｎｏｙｌＣｏＡｈｙｄｒａｔａｓｅ，ｐｅｒｏｘｉｒｅｄｏｘｉｎ－４，ｐｒｏｂａｂｌｅ３－ｏｘｏａｃｉｄＣｏＡｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ１ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ，Ｈｓｐ２７，Ｈｓｐ７０，ＧＲＰ７８，ｃｈａｐｅｒｏｎｅ，ＭＭＰｓ，ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ胰腺癌ａｌｐｈａ－ｅｎｏｌａｓｅ，ＧＡＰＤＨ，ｔｒｉｏｓｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｉｓｏｍｅｒａｓｅ，ｔｒａｎｓｇｅｌｉｎ，ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ，ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ（Ｍｎ）ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｐｒｅｃｕｒｓｏｒ，ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳ－ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅＰ，ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎＡ，ｐｒｏｔｅｉｎｄｉｓｕｌｆｉｄｅｉｓｏｍｅｒａｓｅＡ３ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ，ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＡ－Ｉｐｒｅｃｕｒｓｏｒ消化道鳞状上皮细胞癌ａｌｐｈａ－ａｃｔｉｎｉｎ４，ｌａｍｉｎｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｂｅｔａ－ｃａｔｅｎｉｎ在各类消化系统肿瘤都有较高出现频率的蛋白ａｎｎｅｘｉｎｓ，ＨＳＰｍｅｍｂｅｒｓ，ｃｈａｐｅｒｏｎｉｎ，ｅｎｏｌａｓｅ，Ｓ１００Ａ４，ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ，ｔｒｉｏｓｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｉｓｏｍｅｒａｓｅ，ａｃｔｉｎｉｎ，ｃａｔｅｎｉｎ，Ｃｙｒ６１１胃癌胃癌是我国主要的恶性肿瘤之一，其发病率居消化道恶性肿瘤之首。目前我国每年新发胃癌患者超过４０万人，因胃癌死亡患者３０万人，患病率和死亡率超过世界平均水平的两倍。Ｔａｋｉｋａｗａ等［１］采用双向凝胶电泳（ｔｗｏｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，２ＤＥ）和质谱（ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，ＭＳ）等技术，对高度转移的胃癌细胞系ＭＫＮ４５Ｐ和它的母细胞系ＭＫＮ４５的蛋白质组进行比较，发现２６个蛋白质点出现明显的表达差异。通过ＭＡＬＤＩＴＯＦＭＳ（基质辅助的激光解吸／电离飞行时间质谱）等方法鉴定了其中的１３种蛋白质，包括参与蛋白质合成的转移ＲＮＡ合成酶（ｔｒａｎｓｆｅｒＲＮＡｓｙｎｔｈａｓｅ），参与细胞代谢的黄素蛋白（ｆｌａｖｏｐｒｏｔｅｉｎｓｕｂｕｎｉｔ）、丙酮酸激酶（ｐｙｒｕｖａｔｅｋｉｎａｓｅ）和腺苷酸（ａｄｅｎｙｌａｔｅｋｉｎａｓｅ），参与细胞信号转导的膜联蛋白Ｉ、膜联蛋白Ａ２（ａｎｎｅｘｉｎｓＩａｎｄＡ２），参与细胞骨架构成的角蛋白５（ｋｅｒａｔｉｎ５）和细胞角蛋白８（ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ８）等。Ｓｕｅｈａｒａ等［２］采用蛋白组学方法筛选胃肠道间质瘤（ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｓｔｒｏｍａｌｔｕｍｏｒｓ，ＧＩＳＴ）的相关蛋白。在预后较好和较差两组ＧＩＳＴ样本中，有４３个蛋白质点出现统计学差异。ＭＳ技术鉴定２５种蛋白质，其中８个蛋白质点确定为钾通道蛋白ｐｆｅｔｉｎ。蛋白免疫印迹法（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ）和实时聚合酶链反应（ｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ）证实了ｐｆｅｔｉｎ的表达程度与肿瘤的转移潜能成反比。对２１０例患者的临床资料分析发现，ｐｆｅｔｉｎ阳性病人的５年存活率（９３．９％）远远高于ｐｆｅｔｉｎ阴性病人的５年存活率（３６．２％）。这些结果提示ｐｆｅｔｉｎ可能作为ＧＩＳＴ预后的标志物和潜在的分子治疗靶标。Ｗａｎｇ等［３］研究发现，转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）能够增强胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１的转移和侵袭潜能，利用２ＤＥ和ＭＳ等技术，发现ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｐｉ（ＧＳＴｐｉ），ｃｏｆｉｌｉｎ和ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ２７（ＨＳＰ２７）３种蛋白可被ＴＧＦβ１诱导，可能参与肿瘤的转移和侵袭。Ｃｈｅｎ等［４］采用蛋白质芯片（ｐｒｏｔｅｉｎｃｈｉｐ）等技术，对转移胃癌细胞系ＴＭＣ１和无转移ＳＣＭ１胃癌细胞系进行研究，分别从两株细胞中鉴定了９２６和９０９种蛋白质，并利用ｃＩＣＡＴ（定量蛋白质组同位素标记）技术确认了其中分别有５５９种和２４０种的蛋３８２第５期徐佳鸣，等：消化系统肿瘤转移相关蛋白质组学的研究进展第２８卷白质出现了差异表达，其中波形蛋白（ｖｉｍｅｎｔｉｎ）和半乳凝素１（ｇａｌｅｃｔｉｎ１）可能成为肿瘤转移的生物学标记物和治疗靶点。２大肠癌近年我国大肠癌发病率连年“走高”，每年新发病人数约１３万～１６万人，死亡人数约６万～９万人，且多发于大中城市，在消化道肿瘤中已仅次于胃癌，位居第二。Ｋａｔａｙａｍａ等［５］对结肠癌细胞系的蛋白质组进行研究，筛选大肠癌转移相关蛋白质。研究对象是ＳＷ４８０和ＳＷ６２０细胞系，ＳＷ４８０来自于大肠癌原发病灶，而ＳＷ６２０来自于同一个病人的淋巴转移癌组织，结果发现９个蛋白位点在两株细胞系有显著的表达改变。采用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析进一步发现，与ＳＷ４８０相比，磷酸丙酮酸水合酶（ａｌｐｈａｅｎｏｌａｓｅ）和磷酸丙糖异构酶（ｔｒｉｏｓｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｉｓｏｍｅｒａｓｅ）在ＳＷ６２０中明显上调，而膜联蛋白Ａ２（ａｎｎｅｘｉｎＡ２）则明显下调。Ｃｏｇｈｌｉｎ等［６］发现伴侣蛋白ＴＣＰ１家族（ｃｈａｐｅｒｏｎｉｎｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｔｃｏｍｐｌｅｘｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ１）中的β和ε亚基在大肠腺癌有明显的过表达。伴侣蛋白能帮助蛋白质在折叠过程中形成稳定的、具有一定功能的蛋白质构象。它的表达改变可能与肿瘤的转移有关，有助于肿瘤细胞完成一些特殊蛋白质的合成。Ｂｒüｎａｇｅｌ等［７］比较１２例原发大肠癌和大肠癌肝转移的蛋白质组差异，发现３种核基质蛋白（ＮＭＰｓ）出现了显著的改变，认为ＮＭＰｓ蛋白可以作为一个很好的指标来预测大肠癌转移。Ｋｉｍ等［８］利用功能蛋白组学的方法对大肠癌转移和侵袭潜能进行研究，发现Ｎ乙酰葡糖胺基转移酶ｖ（ＧｎＴＶ）能使金属蛋白酶１抑制因子（ＴＩＭＰ１）的糖基化过程发生异常改变，这种异常糖基化使ＴＩＭＰ１对基质金属蛋白酶２，９的抑制作用减弱，从而间接地增强大肠癌转移和侵袭的潜能。Ｃｈａｎｇ等［９］比较正常的大肠黏膜上皮、原发大肠癌、大肠癌伴肝转移三者的蛋白质组差异，并分析差异蛋白质对大肠癌细胞系ＳＮＵ８１体外侵袭能力的影响。他们发现，相比于非转移的肿瘤样本，ＡＴＰ合成酶（ＡＴＰｓｙｎｔｈａｓｅ）的α亚基和ｄ亚基在伴转移的肿瘤样本中分别有７８．５％和７５．７％的过表达，ｄ亚基与肿瘤的静脉侵袭及远处转移有很大的相关性。在肿瘤ＩＩＩ期患者中，ｄ亚基的表达水平与病人低存活率存在正相关。在进一步的肿瘤细胞系体外侵袭实验中，发现干扰ＡＴＰ合成酶的α亚基和ｄ亚基可明显降低细胞的侵袭力。他们认为ＡＴＰ合成酶表达上调与大肠癌的肝转移有密切的联系，其机制可能与肿瘤细胞代谢有关。Ａｌｆｏｎｓｏ等［１０］以大肠癌手术标本为材料，使用２ＤＥ结合ＭＳ技术，分析大肠癌的差异蛋白质表达谱，鉴定出４１种差异表达的蛋白质，包括参与调节转录的ｓｙｎｏｖｉａｌｓａｒｃｏｍａＸ５ｐｒｏｔｅｉｎ；参与细胞再生和骨架形成的ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎｓ，ｖｉｍｅｎｔｉｎ和ｂｅｔａａｃｔｉｎ；参与细胞信号转导的ａｎｎｅｘｉｎｓＩＶ和Ｖ，ｒｅｌａｘｉｎ和ＡＰＣ；参与蛋白合成和折叠的ＨＳＰ６０，以及ｃａｌｒｅｔｉｃｕｌｉｎ，ｃａｔｈｅｐｓｉｎＤ和ＲＳＰ４等。３肝癌肝癌是威胁我国人民身体健康的恶性肿瘤，由于缺乏敏感和特异的早期诊断方法，临床上发现多为晚期，死亡率极高。据世界卫生组织统计，全球每年新发肝癌病例１００万至１５０万例。由于我国是肝炎大国，全世界４５％以上的肝癌发生在我国。Ｍｅｌｌｅ等［１１］利用激光捕获显微切割技术（ｌａｓｅｒｃａｐｔｕｒｅｍｉｃｒｏｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ，ＬＣＭ）取正常肝组织、肝癌中心和其边缘组织的细胞。采用２ＤＥ电泳和表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱（ＳＥＬＤＩＴＯＦＭＳ），鉴定出５３种差异表达的蛋白。在肝癌组织中ｆｅｒｒｉｔｉｎｌｉｇｈｔｓｕｂｕｎｉｔ（ＦＬＳ）和ａｄｅｎｙｌａｔｅｋｉｎａｓｅ３ａｌｐｈａｌｉｋｅ１（ＡＫ３）表达下调，而ｂｉｌｉｖｅｒｄｉｎｒｅｄｕｃｔａｓｅＢ（ＢＲＢ）表达上调，临床上利用ＳＥＬＤＩＴＯＦＭＳ蛋白芯片对此３种蛋白质进行分析，可以实现对肝癌发生的早期监测和诊断。Ｂｌａｎｃ等［１２］利用２ＤＥ和ＭＳ技术对３种有不同转移潜能的人类肝癌细胞系Ｈｅｐ３Ｂ，ＭＨＣＣ９７Ｌ和ＭＨＣＣ９７Ｈ进行研究，发现２６种差异表达蛋白质位点。与无转移的Ｈｅｐ３Ｂ细胞系相比，转移的ＭＨＣＣ９７Ｈ和ＭＨＣＣ９７Ｌ细胞系中有１６个蛋白位点发生过表达，另有１０个蛋白质位点表达下调。用免疫组织化学和逆转录ＰＣＲ技术对差异蛋白进行验证。结果提示ａｎｎｅｘｉｎ１和Ｓ１００ｃａｌｃｉｕｍｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎＡ４（Ｓ１００Ａ４）在转移肝癌细胞中显著上调，有望成为新的肝癌转移标记物。Ｌｕｋ等［１３］采用蛋白质组学的方法比较１４６例肝细胞癌组织标本、６７例癌旁组织、１２例正常人的肝３８３第５期国际病理科学与临床杂志第２８卷组织的蛋白质组差异，在１８００个蛋白质位点中，有大约９０个蛋白质表达出现显著的改变，其中伴侣蛋白质Ｈｓｐ２７，Ｈｓｐ７０和ｇｌｕｃｏｓｅｒｅｇｕｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ７８（ＧＲＰ７８）有望作为肝细胞癌的转移标志物。Ｌｉ等［１４］发现在转移的肝癌细胞株中，角蛋白１９片段（ＣＹＦＲＡ２１１）的表达异常。为此，他们研究肝癌患者和肝癌裸鼠模型血清ＣＹＦＲＡ２１１含量的变化。在肝癌细胞系ＨＣＣＬＭ３裸鼠皮下移植模型中，发现在发生转移（如肺转移）的裸鼠血清中ＣＹＦＲＡ２１１水平明显升高。在１０８例肝癌患者中，２４人（２２．２％）ＣＹＦＲＡ２１１水平升高，而在ＣＹＦＲＡ２１１升高的患者中出现门静脉瘤栓的比例（３３．３％）远远高于ＣＹＦＲＡ２１１正常的患者（６．０％）。另外在ＣＹＦＲＡ２１１水平升高的患者中处于恶性转移ＩＩＩ／ＩＶ期的比例（５４．２％）也远远高于ＣＹＦＲＡ２１１水平正常患者的比例（２１．４％）。他们认为ＣＹＦＲＡ２１１在肝癌转移中扮演着不同寻常的角色。４其他消化系统肿瘤Ｍｉｋｕｒｉｙａ等［１５］对胰腺癌组织和正常胰腺组织进行比较蛋白质组学分析。２ＤＥ电泳显示有１１个蛋白质位点在胰腺癌中出现高表达，用液相串联质谱（ＬＣＭＳ／ＭＳ）技术鉴定这些差异蛋白质，分别是ａｌｐｈａｅｎｏｌａｓｅ，ｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ３ｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ（ＧＡＰＤＨ），ｔｒｉｏｓｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｉｓｏｍｅｒａｓｅ，ｔｒａｎｓｇｅｌｉｎ，ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ，ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ（Ｍｎ）ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｐｒｅｃｕｒｓｏｒ，ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅＰ，ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎＡ，ｐｒｏｔｅｉｎｄｉｓｕｌｆｉｄｅｉｓｏｍｅｒａｓｅＡ３ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ和ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＡＩｐｒｅｃｕｒｓｏｒ。有２个蛋白位点被鉴别为磷酸甘油醛脱氢酶（ＧＡＰＤＨ），而另有４个蛋白为糖酵解途径的酶。他们认为在胰腺癌细胞糖酵解程度的改变与癌细胞侵袭、转移的能力有关。Ｆｕ等［１６］对分化程度不同的食管鳞状上皮细胞癌所表达的蛋白质组进行研究。与正常食管组织相比，在食管鳞状上皮癌中有１８个蛋白位点表达出现差异，其中ａｌｐｈａａｃｔｉｎｉｎ４（ＡＣＴＮ４）和６７ｋＤｌａｍｉｎｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒ（６７ＬＲ）的表达水平从肿瘤Ｉ期到ＩＩＩ期渐升。用组织微阵列技术（ｔｉｓｓｕｅｍｉｃｒｏａｒｒａｙｓ，ＴＭＡ）研究其与临床病理学的联系，揭示了ＡＣＴＮ４过表达与肿瘤的侵袭、转移潜能有关，但６７ＬＲ的过表达则只与肿瘤的恶性程度有关。他们认为该两种蛋白可以成为食管鳞状上皮细胞癌诊断和治疗的靶点。Ｏｎｄａ等［１７］采用蛋白质组学方法发现在口腔鳞状上皮细胞癌（ｏｒａｌｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＯＳＣＣ）的转移过程中，Ｌｉｎ７Ｃ／ＶＥＬＩ３／ＭＡＬＳ３（Ｌｉｎ７Ｃ）的表达明显下调。尽管在ＯＳＣＣ原发和继发的肿瘤细胞中Ｌｉｎ７Ｃ基因很少发生突变，但却在基因ＣｐＧ岛区域检测到高频率的甲基化现象，并且甲基化与它表达的下调紧密联系。诱导Ｌｉｎ７Ｃ过表达，可提高ｂｅｔａｃａｔｅｎｉｎ的表达，使肿瘤细胞呈现一种非侵袭性表型。他们认为Ｌｉｎ７Ｃ表达可预测ＯＳＣＣ的转移。Ｍｌｙｎａｒｅｋ等［１８］将不同侵袭表型的鳞状上皮癌细胞移植入免疫缺陷的ＲＡＧ２／ｇａｍｍａ（ｃ）小鼠体内，再采用蛋白质组学的方法对侵袭能力最强和最弱的ＯＳＣＣ进行蛋白质组分析，鉴定出超过５０种差异表达的蛋白，这些蛋白参与细胞代谢、构成、黏附和运动等。Ｃｙｒ６１（ｃｙｓｔｅｉｎｅｒｉｃｈ６１）也是一类与消化系统肿瘤侵袭和转移关系密切的蛋白质。Ｃｙｒ６１蛋白由３８１个氨基酸组成，其编码蛋白具有明显的促有丝分裂原性和趋化性，能刺激细胞增殖、趋化、黏附，诱导血管发生，参与炎症反应、伤口愈合和组织重塑过程。Ｃｙｒ６１在不同肿瘤组织中的表达不一致且具有多重功能。经研究，在食管腺癌、胃癌、结肠癌、肝癌、胰腺癌等消化系统肿瘤中，Ｃｙｒ６１起促进肿瘤细胞侵袭和转移的重要作用［１９］。参考文献［１］ＴａｋｉｋａｗａＭ，ＡｋｉｙａｍａＹ，ＭａｒｕｙａｍａＫ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆａｈｉｇｈｌｙｍｅｔａｓｔａｔｉｃｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅｕｓｉｎｇｔｗｏｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ［Ｊ］．ＯｎｃｏｌＲｅｐ，２００６，１６（４）：７０５７１１．［２］ＳｕｅｈａｒａＹ，ＫｏｎｄｏＴ，ＳｅｋｉＫ，ｅｔａｌ．Ｐｆｅｔｉｎａｓａｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃｂｉｏｍａｒｋｅｒｏｆｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｓｔｒｏｍａｌｔｕｍｏｒｓｒｅｖｅａｌｅｄｂｙｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ［Ｊ］．ＣｌｉｎＣａｎｃｅｒＲｅｓ，２００８，１４（６）：１７０７１７１７．［３］ＷａｎｇＫ，ＬｉＪ，ＺｈｅｎＣ，ｅｔａｌ．Ｅｎｈａｎｃｅｄｉｎｖａｓｉｖｅａｎｄｍｅｔａｓｔａｔｉｃｐｏｔｅｎｔｉａｌｉｎｄｕｃｅｄｂｙｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ１ｍｉｇｈｔｂｅｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｐｉ，ｃｏｆｉｌｉｎａｎｄｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ２７ｉｎＳＧＣ７９０１ｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＡｃｔａＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＳｉｎ，２００７，３９（７）：５２０５２６．［４］ＣｈｅｎＹＲ，ＪｕａｎＨＦ，ＨｕａｎｇＨＣ，ｅｔａｌ．Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｐｒｏｔｅｏｍｉｃａｎｄｇｅｎｏｍｉｃｐｒｏｆｉｌｉｎｇｒｅｖｅａｌｓｍｅｔａｓｔａｓｉｓｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐａｔｔｅｒｎｓｉｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＪＰｒｏｔｅｏｍｅＲｅｓ，２００６，５（１０）：２７２７２７４２．［５］ＫａｔａｙａｍａＭ，ＮａｋａｎｏＨ，ＩｓｈｉｕｃｈｉＡ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｔｅｉｎｐａｔｔｅｒｎｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｃｏｌｏｎｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅｓｅｘａｍｉｎｅｄｂｙｔｗｏｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｉｎｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓａｎｄｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ［Ｊ］．ＳｕｒｇＴｏｄａｙ，２００６，３６（１２）：１０８５１０９３．［６］ＣｏｇｈｌｉｎＣ，ＣａｒｐｅｎｔｅｒＢ，ＤｕｎｄａｓＳＲ，ｅｔａｌ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎａｎｄｏ３８４第５期徐佳鸣，等：消化系统肿瘤转移相关蛋白质组学的研究进展第２８卷ｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｃｈａｐｅｒｏｎｉｎｔｃｏｍｐｌｅｘｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．ＪＰａｔｈｏｌ，２００６，２１０（３）：３５１３５７．［７］ＢｒüｎａｇｅｌＧ，ＳｃｈｏｅｎＲＥ，ＢａｕｅｒＡＪ，ｅｔａｌ．Ｎｕｃｌｅａｒｍａｔｒｉｘｐｒｏｔｅｉｎａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｃｏｌｏｎｃａｎｃｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｔｏｔｈｅｌｉｖｅｒ［Ｊ］．ＣｌｉｎＣａｎｃｅｒＲｅｓ，２００２，８（１０）：３０３１３０３３．［８］ＫｉｍＹＳ，ＨｗａｎｇＳＹ，ＫａｎｇＨＹ，ｅｔａｌ．ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓｓｔｕｄｙｒｅｖｅａｌｓｔｈａｔＮＡｃｅｔｙｌｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅＶｒｅｉｎｆｏｒｃｅｓｔｈｅｉｎｖａｓｉｖｅ／ｍｅｔａｓｔａｔｉｃｐｏｔｅｎｔｉａｌｏｆｃｏｌｏｎｃａｎｃｅｒｔｈｒｏｕｇｈａｂｅｒｒａｎｔｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎｏｎｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ１［Ｊ］．ＭｏｌＣｅｌｌＰｒｏｔｅｏｍｉｃｓ，２００８，７（１）：１１４．［９］ＣｈａｎｇＨＪ，ＬｅｅＭＲ，ＨｏｎｇＳＨ，ｅｔａｌ．ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌＦｏＦ１ＡＴＰｓｙｎｔｈａｓｅｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．ＣａｎｃｅｒＳｃｉ，２００７，９８（８）：１１８４１１９１．［１０］ＡｌｆｏｎｓｏＰ，ＮúｅｚＡ，ＭａｄｏｚＧｕｒｐｉｄｅＪ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｂｙｔｗｏｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ［Ｊ］．Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ，２００５，５（１０）：２６０２２６１１．［１１］ＭｅｌｌｅＣ，ＥｒｎｓｔＧ，ＳｃｈｅｉｂｎｅｒＯ，ｅｔａｌ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｏｔｅｉｎｍａｒｋｅｒｓｉｎｍｉｃｒｏｄｉｓｓｅｃｔｅｄｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ［Ｊ］．ＪＰｒｏｔｅｏｍｅＲｅｓ，２００７，６（１）：３０６３１５．［１２］ＢｌａｎｃＪＦ，ＬａｌａｎｎｅＣ，ＰｌｏｍｉｏｎＣ，ｅｔａｌ．ＰｒｏｔｅｏｍｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａｄｅｖｅｌｏｐｅｄｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｃｈｒｏｎｉｃｖｉｒａｌｈｅｐａｔｉｔｉｓＣ［Ｊ］．Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ，２００５，５（１４）：３７７８３７８９［１３］ＬｕｋＪＭ，ＬａｍＣＴ，ＳｉｕＡＦ，ｅｔａｌ．ＰｒｏｔｅｏｍｉｃｐｒｏｆｉｌｉｎｇｏｆｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａｉｎＣｈｉｎｅｓｅｃｏｈｏｒｔｒｅｖｅａｌｓｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎｓ（Ｈｓｐ２７，Ｈｓｐ７０，ＧＲＰ７８）ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｉｒａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃｖａｌｕｅｓ［Ｊ］．Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ，２００６，６（３）：１０４９１０５７．［１４］ＬｉＹ，ＴａｎｇＺＹ，ＴｉａｎＢ，ｅｔａｌ．ＳｅｒｕｍＣＹＦＲＡ２１１ｌｅｖｅｌｒｅｆｌｅｃｔｓｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａｍｅｔａｓｔａｓｉｓ：ｓｔｕｄｙｉｎｎｕｄｅｍｉｃｅｍｏｄｅｌａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．ＪＣａｎｃｅｒＲｅｓＣｌｉｎＯｎｃｏｌ，２００６，１３２（８）：５１５５２０．［１５］ＭｉｋｕｒｉｙａＫ，ＫｕｒａｍｉｔｓｕＹ，ＲｙｏｚａｗａＳ，ｅｔａｌ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｇｌｙｃｏｌｙｔｉｃｅｎｚｙｍｅｓｉｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｐａｎｃｒｅａｔｉｃｃａｎｃｅｒｏｕｓｔｉｓｓｕｅｓａｓｅｖｉｄｅｎｃｅｄｂｙｐｒｏｔｅｏｍｉｃｐｒｏｆｉｌｉｎｇｂｙｔｗｏｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓａｎｄｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ／ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ［Ｊ］．ＩｎｔＪＯｎｃｏｌ，２００７，３０（４）：８４９８５５．［１６］ＦｕＬ，ＱｉｎＹＲ，ＸｉｅＤ，ｅｔａｌ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｌｐｈａａｃｔｉｎｉｎ４ａｎｄ６７ｋＤａｌａｍｉｎｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒａｓｓｔａｇｅｓｐｅｃｉｆｉｃｍａｒｋｅｒｓｉｎｅｓｏｐｈａｇｅａｌｃａｎｃｅｒｖｉａｐｒｏｔｅｏｍｉｃａｐｐｒｏａｃｈｅｓ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ，２００７，１１０（１２）：２６７２２６８１．［１７］ＯｎｄａＴ，ＵｚａｗａＫ，ＮａｋａｓｈｉｍａＤ，ｅｔａｌ．Ｌｉｎ７Ｃ／ＶＥＬＩ３／ＭＡＬＳ３：ａｎｅｓｓｅｎｔｉａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｉｎｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｈｕｍａｎｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ［Ｊ］．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ，２００７，６７（２０）：９６４３９６４８．［１８］ＭｌｙｎａｒｅｋＡＭ，ＢａｌｙｓＲＬ，ＳｕＪ，ｅｔａｌ．Ａｃｅｌｌｐｒｏｔｅｏｍｉｃａｐｐｒｏａｃｈｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｓｅｃｒｅｔａｂｌｅｂｉｏｍａｒｋｅｒｓｏｆｉｎｖａｓｉｖｅｎｅｓｓｉｎｏｒａｌｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ［Ｊ］．ＡｒｃｈＯｔｏｌａｒｙｎｇｏｌＨｅａｄＮｅｃｋＳｕｒｇ，２００７，１３３（９）：９１０９１８．［１９］马海芬，赵仲生．Ｃｙｒ６１与消化系统肿瘤侵袭和转移的关系［Ｊ］．国际病理科学与临床杂志，２００７，２７（６）：４８４４８８．ＭＡＨａｉｆｅｎ，ＺＨＡＯＺｈｏｎｇｓｈｅｎｇ．ＳｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆＣｙｒ６１ｉｎｄｉｇｅｓｔｉｖｅｓｙｓｔｅｍｎｅｏｐｌａｓｍｓｉｎｖａｓｉｏｎａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓ［Ｊ］．ＩｎｔＪＰａｔｈｏｌＣｌｉｎＭｅｄ，２００７，２７（６）：４８５４８８．３８５