中医药治疗儿童性早熟的研究述评王静 摘 要:性早熟属于一种生长发育的异常.表现为青春期特征提前出现。女孩8周岁以前开始乳房发 育,1O周岁以前出现月经;男孩10周岁以前出现睾丸、阴茎增大等特征为性早熟
目的 探讨儿童鼻后滴漏综合征(PNDS)致慢性咳嗽的临床特点和治疗方法。方法 92例患儿临床确诊为鼻后滴漏综合征后采用抗炎、抗变态反应、局部使用减充血剂、糖皮质激素等系统治疗。结果 92例患儿均随诊2
补肾健脾方与环磷酰胺合用对肾病模型大鼠性腺的影响王 静1,武宝通2 (1.山东中医药大学附属青岛市中医院中医儿科,山东 青岛266033;2.青岛大学医学院附属青岛市海慈医院泌尿外科(山东 青岛266033 )[摘要] 目的:探讨补肾健脾方对肾病大鼠性腺和性激素影响的作用机制。方法:采用盐酸阿霉素大鼠尾静脉注射建立实验性肾病综合征大鼠,分别观察环磷酰胺(CTX)单用和与补肾健脾方联合使用对肾病大鼠性腺及性激素的影响。结果:补肾健脾方和CTX联合使用与单独使用CTX相比,二者联合使用可使大鼠的血清睾酮(Ts)含量明显高于CTX致性腺损伤大鼠的Ts含量,同时具有降低卵泡刺激素(FSH),促黄体生成素(LH)含量,两组比较差异均有统计学意义(p<0.05),调节性激素水平趋向正常。结论:补肾健脾方可补肾健脾保护和促进生殖机能,并可能通过促进下丘脑—垂体—性腺轴的组织形态学改变和调节其内分泌、以及清除自由基,发挥对抗或减轻CTX的性腺毒性的作用。[关键词]难治性肾病综合征;健脾补肾中药;环磷酰胺;性腺;大鼠[中图分类号] R [文献标识码] A [文章编号] 1007-659X(2011)05-肾病综合征(Nephrotic Syndrome,NS)是由多种病因和多种病理类型引起肾小球疾病中的一组临床综合征,典型临床表现为大量蛋白尿(每日≥3.0~3.5g)、低蛋白血症(血浆白蛋白<30g/L)、高脂血症和水肿。NS是小儿泌尿系常见病,其中难治性肾病综合征(Refractory Nephrotic Syndrome,RNS)约占NS的50%左右,临床治疗颇为棘手。治疗过程中出现:(1)频繁复发(指半年内复发2次,1年内复发3次)或泼尼松依赖者;(2)初治8周有反应,但复发再治无效应;(3)泼尼松初治8周无效应或仅有部分效应;(4)免疫抑制剂联合治疗无效者。凡具备上述任何一种情况者,即可诊断为RNS[1]。环磷酰胺(Cytoxan,CTX)是治疗小儿RNS最有效的药物之一,由于其对性腺的毒性作用,尤其对男性精原细胞的影响,限制了该药在临床上的广泛应用。我们通过动物实验,旨在研究中药补肾健脾方与CTX合用对大鼠性腺的影响,为今后临床应用CTX治疗肾病时,减轻其对性腺的损害提供一定的用药经验和佐证。1材料与方法1.1实验动物 原交系健康雄性Wistar大鼠40只,6周龄,体质量160~190g,购于山东大学实验动物中心,SPF级。1.2主要试剂与仪器 血清睾丸酮(Ts)、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)放免测定试剂盒,购于天津得普生物科学公司(批号 980811)。DDL-5冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂,速度:4000转,时间:10 min),GMJ型全自动放射免疫γ计数器(江苏医疗电子研究所)。1.3试验药品 盐酸阿霉素(ADR针剂)10 mg/支(批号 0303E1,深圳万乐药业有限公司);0.9%生理盐水10 ml/支(批号 030519);CTX200 mg/支(批号 030404,上海华联制药有限公司);泼尼松5 mg/片(批号 0304021,山东新华制药股份有限公司);4%异戊巴比妥钠(批号 860122,union进口分装 上海化学试剂采购供应站分装厂);中药补肾健脾方水煎液(成分:黄芪12 g,淫羊藿10 g,白术12 g,巴戟天10 g,肉苁蓉10 g,菟丝子10 g,当归12 g,枸杞子15 g,陈皮10 g,五味子6 g)经煎煮、过滤,制成100%水煎剂,1 ml药液约含1 g生药。以上药品均购于山东中医药大学附属医院。2方法2.1 实验分组 40只Wistar雄性大白鼠随机分为4组,即空白对照组、模型对照组、CTX组、CTX+中药组,每组10只。2.2实验造模 除空白对照组外,余3组建立NS动物模型。大鼠非麻醉下以ADR6 mg/kg量,尾静脉一次注射性造模(临用时ADR用注射用水配成2 mg/ml的溶液)[2]。空白对照组注射等量的生理盐水。注射后将大鼠饲养于代谢笼中,自由摄食饮水,并于注射后第7、8、9天开始记录尿蛋白定性情况,当尿蛋白定性≥ +++,并持续3 d以上者,即为模型制作成功。四组动物共死亡5只,其中CTX组1只因尾部严重感染于治疗后第5天死亡;CTX+中药组因灌胃不当,窒息死亡2只;模型对照组因未做治疗,于造模成功后第4天尾部严重感染死亡1只,第15天不明原因死亡1只,考虑可能与ADR和CTX均有较强的细胞毒性有关。2.3 实验方法 造模成功后,4组均正常饮食。CTX组和CTX+中药组腹腔注射CTX,每次20 mg/kg,隔日1次,一周3次,共12次。其总量相当于临床患儿的用药总量,平均每天用量(10mg/kg)相当于临床用量(2~3mg/kg·d)的3~5倍。CTX+中药组除CTX用法同上外,再予中药补肾健脾方煎剂每日灌胃10ml/kg。两组均每日灌服泼尼松5 mg/kg,晨起顿服,每天1次,连续4周。(CTX组和CTX+中药组均需每周称重以随时调整用药剂量),给药剂量按《中医科研设计与统计方法》提供的常用动物与人的不同体质量的药物换算公式计算。(公式:D1:D2=R1:R2,D2=D1×D2÷R1 D2为所求剂量,D1为已知剂量,R1为相应已知值,R2为与待求剂量D2相应动物体表面积换算比值)。实验期间每周记录一次动物的一般情况,并于造模前、造模后1周和用药4周后单个地置于代谢笼,禁食1天,收集24 h尿液,检测24 h尿蛋白定量。于用药4周后全部动物先用4%异戊巴比妥钠按4 mg/kg麻醉,行腹主动脉取血,大约5 ml。送往实验室检测血生化和性激素。Ts、FSH、LH,用放射免疫方法测定含量,由山东中医药大学附属医院核医学室协助测定。2.4 实验观察 一般情况(大鼠饮食、体质量、尿量、水肿状况、毛泽、活动性、存活率等),用药前后大鼠体质量的变化,用药前后大鼠24 h尿蛋白定量的变化,用药前后各组大鼠血生化比较,用药前后各组大鼠Ts、FSH、LH含量比较。2.5 统计学处理 数据处理用均数±S表示,多组均数间的比较用F检验,组间两两比较用Q检验。3结果3.1 一般观察 模型组食量明显减少,尿量减少,并出现明显浮肿,精神萎靡,倦怠少动,消瘦,皮毛无光泽,并有竖毛、脱毛现象。两个治疗组的动物在用药后,上述表现明显改善,尤以CTX+中药组改善明显。3.2 各组大鼠体质量变化比较 见表1。表1 各组大鼠体质量变化比较(g,±S)空白对照组模型对照组CTX组CTX+中药组n10898造摸前175.91±7.63183.82±1.63176.92±4.65179.84±9.33用药4周后230.56±4.39*160.13±3.49199.29±6.65*229.77±2.81**与模型对照组比较 * P﹤0.05,与CTX组比较 * P﹤0.05表1显示 实验前各组大鼠体重无明显差异(P﹥0.05)。用药4周后CTX+中药组和CTX组大鼠体重明显高于模型对照组,有显著性差异(P﹤0.05),CTX+中药组大鼠体重高于CTX组,有显著性差异(P﹤0.05)。3.3 用药前后大鼠24h 尿蛋白定量的变化 见表2。表2 用药前后大鼠24h 尿蛋白定量的变化 (mg/24h,±S)空白对照组模型对照组CTX组CTX+中药组n10989造模前8.17±1.937.69±1.388.37±2.637.91±1.95造模后第1周7.91±0.48184.06±5.35*186.43±4.80*179.59±4.87*用药4周后8.04±0.50*191.76±7.6059.39±10.11*33.25±6.73**与模型对照组比较 * P﹤0.05,与CTX组比较 * P﹤0.05表2显示 造模前各组大鼠尿蛋白无明显差异(P﹥0.05)。造模后1周,除空白对照组外,余三组尿蛋白均升高,且与空白对照组比较有显著性差异(P﹤0.05),组间无差别(P﹥0.05)。用药4周后,CTX组和CTX+中药组尿蛋白都有所降低,与模型对照组相比均有显著差异(P﹤0.05),CTX+中药组尿蛋白水平低于CTX组,有显著性差异(P﹤0.05)。3.4 用药4周后大鼠血生化比较 见表3。表3 用药4周后大鼠血生化比较 (±S)空白对照组模型对照组CTX组CTX+中药组n10898Tp(g/l)64.47±6.87*47.08±5.0755.73±6.81*62.33±3.09**Alb(g/l)28.60±3.80*20.32±3.4723.97±2.15*27.55±3.42**Ch(mmol/l)3.83±0.32*6.56±0.335.04±0.55*3.81±0.40**TG(mmol/l)1.13±0.17*2.31±0.171.70±0.06*1.25±0.13**BUN(mmol/l)5.93±0.505.81±0.906.23±1.305.61±0.60Cr(mmol/l)61.7±4.9063.1±5.6066.9±4.3063.4±2.70与模型对照组比较 * P﹤0.05,与CTX组比较 * P﹤0.05表3显示 用药4周后,CTX组、CTX+中药组与模型对照组相比总蛋白(Tp)、白蛋白(Alb)有显著升高(P﹤0.05),胆固醇(Ch)、甘油三酯(TG)有显著降低(P﹤0.05),且两组间有比较均有显著差异(P﹤0.05)。尿素氮(BUN)、肌酐(Cr):各组间无明显差别(P﹥0.05)。3.5 用药4周后大鼠性激素定量的变化 见表4。表4 用药4周后大鼠性激素定量的变化 (±S)组别空白对照组模型对照组CTX组CTX+中药组n10898Ts(ng/24h)1.98±0.062.11±0.301.04±0.32*1.78±0.14**LH(IU/24h)5.23±0.654.90±0.747.86±0.64*5.69±0.29**FSH(IU/24h)3.98±0.623.94±0.577.01±1.00*4.66±0.59**与模型对照组比较 * P﹤0.05,与CTX组比较 * P﹤0.05表4显示 用药4周后,CTX组、CTX+中药组与模型对照组相比Ts有显著降低,LH 、FSH 有显著升高(P﹤0.05)。并且,CTX+中药组与CTX组相比Ts含量有明显升高,LH 、FSH 有显著降低,均有显著性差异(P﹤0.05)。4讨论NS在祖国医学中并无此病名记载,从其主要症状水肿、蛋白尿以及相应的病理机制上讲,它散在的记载于“水肿”、“精微下漏”、“癃闭”、“关格”、“虚损”等病证中。小儿RNS的根本病机为脾肾亏虚,且临床多见脾虚湿困,肾阳虚损证,病性属虚中夹实,补肾健脾方切合病机,以扶正为主,治以补气健脾,温肾壮阳,补血固精;以祛邪为辅,治以利水消肿。使阴阳互补,气血相生,补泻并施,散敛兼顾。本实验研究表明,中药补肾健脾方可降低大鼠蛋白尿,升高血清Tp和Alb,降低Ch和TG含量,从而治疗NS本身症状;此外,补肾健脾方和CTX联合使用与单独使用CTX相比,联合使用可使大鼠的Ts含量明显高于CTX致性腺损伤大鼠的Ts含量,同时具有降低FSH、LH含量。 CTX+中药组与CTX组的Ts、FSH、LH相比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。说明补肾健脾方和CTX联用可以调节性激素水平趋向正常的作用。结合有关资料分析认为[3],补肾健脾方可以补肾健脾保护和促进生殖机能,并可能通过促进对下丘脑—垂体—性腺轴的组织形态学改变和调节其内分泌,以及抗氧化、清除自由基的作用来发挥对抗或减弱CTX造成的性腺损害。因此,通过调节Ts、FSH、LH的平衡而防治CTX所致的性腺抑制,可以被认为是中药补肾健脾方的作用机理之一,补肾健脾方与CTX合用治疗RNS,可以提高疗效,且可在一定程度上减轻CTX导致的性腺损害,为临床应用提供了一定的依据。[参考文献][1] 杨倩春. 杨霓芝教授治疗难治性肾病综合征的临床经验[J]. 中国中西医结合肾病杂志,2003,4(9):500-502.[2] 胡明昌,蔡毅,陈荣华.柔红霉素及其衍生物肾病模型的研究[J].中华儿科杂志,1989,21(5):120.[3] 陆军,李祥民,李志骏.儿童肾病综合征中药治疗及其机制的现代研究概况[J].中国中西医结合杂志,1996;16(7):444-448.王静,女,医学硕士,主治医师,研究方向:中医儿科。武宝通,男,医学硕士,副主任医师。研究方向:泌尿外科及男科学。